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准确的猪肺炎支原体诊断具有挑战性但必不可少

Source:adminAuthor:阿诚 Addtime:2018/12/18 Click:
猪肺炎支原体
牛丘支原体(M. hyo)感染的诊断仍然具有挑战性,但是当采用系统方法并且临床表现与实验室检测结果一致时,可以放心地做出这一点,爱荷华州立大学临床教授,DVM Kent J. Schwartz说。
 
施瓦茨告诉猪健康今天,即使猪出现咳嗽和呼吸困难,指向猪肺炎支原体地方性肺炎,也需要确诊,因为疾病迹象可能是由于其他原因引起的。
 
当M.hyo定植于呼吸道的纤毛时,诊断M.hyo尤其困难。在出现临床症状之前,可以经过数周或数月。同时,饲料转化率和平均日增重可能受到影响。在这些病例中,M.hyo的临床表达取决于许多因素,例如猪易感性,M.hyo细菌负荷和菌株毒力以及加剧的细菌和病毒共感染的存在,他说。
 
从观察开始
Schwartz建议的系统方法从临床观察开始。“仅仅观察猪可以帮助确定是否存在猪肺炎支原体感染,但为了准确,猪应该在其环境中进行常规检查,以确定疾病,异常和危险因素。”
 
感染M. hyo感染的临床症状往往在种植者或肥育者期间看到。他说:“大多数猪肉生产商都能认识到的咳嗽很可能是在一天开始时的运动中发生的。”
 
他说,单独使用猪肺炎支原体感染通常不会发烧,与猪流感或猪繁殖与呼吸综合症(PRRS)的爆发相比,饲料消耗仅略有下降。M. hyo相关的临床疾病通常是自限性的,除非猪具有免疫学上的天真或它们具有复杂的感染或异常的环境压力。
 
当存在共感染并且猪呼吸道疾病复合体(PRDC)作为M.hyo感染的并发症出现时,情况恶化。施瓦茨说,这就是死亡率急剧上升的时候。
 
PRDC爆发的常见病毒共感染包括PRRS病毒,甲型流感病毒和2型猪圆环病毒。常见的细菌共感染包括多杀巴斯德氏菌,猪链球菌,副猪嗜血杆菌和猪链球菌,兽医继续存在。
 
寻找严重的病变
临床观察后应进行尸检,以寻找M. hyo感染或其他病原体特征的严重病变。施瓦茨说:“这就是你问'这种病可能导致这种疾病的原因?'
 
M. hyo相关肺炎将导致肺部明显可见的病变,通常在前叶和中叶的下部巩固。在不复杂的病例中,所涉及的肺量可以变化并且可以超过总肺容量的10%。然而,他说,个体猪的病变差异很大,从几乎不存在到肺容量的30%。他说,如果更多的肺容量受到影响,可能还会涉及其他细菌因素。
 
组织病理学评估
Schwartz的名单上的组织病理学评估是M. hyo的诊断。肺病变的显微镜检查旨在鉴定与M.hyo受累相容的组织变化。它还可以帮助排除其他呼吸道病原体。
 
他说,组织病理学是在福尔马林固定的肺切片上进行的,最好来自受影响的安乐死猪,因为自然死亡的猪通常会产生混淆的共感染。
 
施瓦茨说:“大约1x3x3厘米的肺部 - 一个火柴盒的大小 - 应该从看起来或感觉不同的肺的每个部分收集。” 这些部分应包括过渡部分(正常部分和异常部分)以及可见气道部分。通常,这将来自靠近较大气道的肺部较高部位的区域,而不仅仅是各种肺叶的巩固尖端。
 
M. hyo特异性测试
Schwartz建议在评估临床症状,严重病变和组织病理学后进行M. hyo特异性实验室检查,因为M. hyo的无症状携带者很常见。
 
他说,培养M. hyo将证实诊断,但很少使用,因为这是一个繁琐,耗时且昂贵的过程。
 
Schwartz警告说,实验室通常会提供他们提供的测试曲目以及他们使用的方法。基于这些原因,他建议不要比较不同实验室的数值结果。
 
用于确定样品或样品中是否存在M.hyo的选择的测试是聚合酶链式反应(PCR)。根据所使用的实验室,PCR检测存在差异 - 例如,实时PCR或“嵌套”PCR - 但对于所有这些,获得准确检测结果的最重要因素是采样技术和质量,他说。
 
如果运送时间<48小时,新鲜样品应在冰上运输,但如果运输时间> 48小时,则优选冷冻样品进行PCR检测。
 
样本类型可能有所不同,并且通常受到诸如收集技术专业知识,测试可用性或运输物流等因素的影响。Schwartz按照它们最有可能检测到M. hyo的顺序引用了首选的PCR样品类型:
 
支气管肺泡灌洗被认为是黄金标准。在尸检时可以容易地获得样品并且可以在死前进行。
在尸检时也很容易获得气道拭子,并且可以获得生殖器拭子。
受影响的肺组织是另一种在尸体剖检时获得的简单样本。寻找巩固组织近端的样本。靠近门的气道最容易携带与肺炎有关的病原体。抵制仅提交坚固的远端肺叶的诱惑。新鲜肺部样本应该是高尔夫球大小的,并且应该代表看起来或感觉不同的肺的每个部分。
深鼻咽拭子需要动物束缚和适当的拭子设计。
扁桃体刮擦需要动物束缚,窥器和长柄取出器械。
深鼻拭子需要动物克制。它们可以在一些症状性猪中产生阳性结果。口服液易于获得并且可用于检测有症状群体中的hyo,但是用于确定无症状群体是否亚临床感染M.hyo的不良样品。
是猪肺炎支原体引起的疾病?
即使发现M. hyo存在,也不能证明它是疾病的原因。Schwartz说,可以回答这个问题的测试是免疫组织化学(IHC),荧光抗体技术(FAT)和原位杂交(ISH),因为它们可以显示典型病变中特定生物体的可视化。
 
所有这三种技术对M. hyo都具有高度特异性,但它们固有地不如PCR敏感,因为对于M. hyo的检测,它们需要存在相对大量的病原体。他强调,这些测试的准确性在很大程度上取决于样本质量和疾病阶段。
 
施瓦茨解释说,FAT是在新鲜组织上进行的,而IHC和ISH是在与FAT相同的区域取得的福尔马林固定切片上进行的。他建议在急性临床疾病的早期阶段从动物身上提交新鲜和福尔马林固定的样本,而没有大量继发细菌受累的证据。
 
“在肺部选择一个合适的病变部位。应获得1至2厘米厚的受影响肺切片以及过渡区和未受影响的肺; 他们应该包含可见的小气道,“他继续道。样品应通过快速冷却进行FAT检测或立即浸入福尔马林进行IHC和ISH(以及组织病理学检查)来保存。切勿冻结FAT,IHC,ISH或组织病理学样本。
 
抗体检测
用商业ELISA测试进行的血清学检测是确定群体感染状态的最常见和最经济的方法。它可用于检测非临床猪群中的M. hyo暴露,但测试灵敏度较差。Schwartz说,换句话说,它可能无法识别感染的,无症状的携带动物。
 
“定植后几周内不会发生血清转换,然后仅在定植猪中偶尔发生血清转换。然而,如果你发现了血清学上的阳性动物,你应该担心种群是殖民化的,当牛群没有接种M. hyo时,尤其如此,“他说。
 
 把它包起来
“一旦你使用这个系统过程收集所有信息,分析,思考并将有效和相关的科学文献纳入你的结论,”施瓦茨说。
 
“问这一切是否有意义。询问临床发现是否符合严重病变和M. hyo特异性检查。如果结论是M. hyo存在并且是疾病的原因,那么你可以继续制定治疗和控制策略,“他说。